医学检验初级中级职称考试小秘籍之临床检验基础 （记住这些基本80分以上）

一、血液生理概要

1.血清与血浆区别:血清缺少纤维蛋白原等凝血因子（I、II、V、VIII）

2.血液pH为7.35-7.45（动脉血7.4、静脉血7.35）

3.血液比密：正常男性约为1.055～1.063，女性约为1.051～1.060，相对黏度为4～5；血浆比密约为1.025～1.030；

4.血浆渗透量：正常人约为290～310mOsm/（kg·H20）。

5.血液特性：悬浮稳定性、黏滞性（纤维蛋白原、球蛋白）、凝固性。

6.血液生理功能：具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。

二、采血方法                                                                                       

1.静脉采血法

①采血部位：肘部静脉（首选）、手背静脉、内踝静脉

②消毒应从内向外、顺时针进行消毒

③扎压脉带：时间应小于1min，＞2min会影响结果

④穿刺：见回血后立即去掉压脉带

⑤放血与混匀：取下注射器针头，将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中，轻轻混匀抗凝血避免溶血发生

⑥应避免同侧采血，间隔1h以上，影响结果

2.末梢采血法（方便快捷）

①采血部位：WHO推荐采集左手无名指内侧血液；婴幼儿可采集大趾或足跟内外侧缘。

②进行多项检查时，采血顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数、血型鉴定

③采血不顺时不可用力挤压

④耳垂采血法已淘汰（结果不恒定，易受环境温度影响）

3.采血管选择

三、抗凝剂选择

1.乙二胺四乙酸（EDTA）：能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。Na盐溶解度低于钾盐。

2.草酸盐（双草酸盐）：与钙离子形成沉淀；草酸钾与草酸铵（血小板计数）按4:6混匀

3.肝素：与抗凝血酶结合，加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用。可用于生化、红细胞渗透脆性试验、血气分析等项目

4.枸橼酸盐：能与血液中钙离子结合成螯合物，枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1：9（凝血）或1：4（血沉）。可作为血液保养液

四、血涂片制备与染色

1.推片方法：手工推片法和厚血膜推片法（疟原虫）

2.瑞氏染料由酸性伊红和碱性美兰组成，溶解在甲醇溶液中，对细胞质成分染色较好

3.吉姆萨染液由伊红和天青组成，对细胞核、寄生虫染色较好

4.酸性环境中带正电荷多易与伊红结合、碱性环境中负电荷增多易与美兰结合

5.磷酸盐缓冲液pH为6.4-6.8（改变细胞所带电荷促进染色进行）

6.可用rA表示瑞氏染料质量规格

7.血涂片质量控制

①血滴大、角度大、推片速度快，血膜厚

②血滴小、角度小、推片速度慢，血膜薄

8.血涂片应观察体尾交界处，以红细胞为标尺

二、红细胞检查

一、概要

1.红细胞是血液中数量最多的有形成分，主要功能是运输氧气和二氧化碳

2.血红蛋白中，主要是HbA（α2β2），新生儿血红蛋白中含有大量HbF（α2γ2），也叫胎儿血红蛋白、抗碱血红蛋白、 Hbbarts（γ4），HbA2（α2δ2）

3.红细胞平均寿命约为120d，衰老红细胞主要在脾破坏，分解为铁、珠蛋白和胆红素

二、红细胞计数                                                

1.改良牛鲍计数板法计数红细胞

（1）牛鲍计数板：计数池高0.1mm，内划有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大格，每个大格面积为1.0mm2，容积为0.1μl

（2）红细胞悬液配制：10μl血液加2ml红细胞稀释液（NaCl调节渗透压、Na2SO4提高比密防止细胞粘连、HgCl2防腐）

2.计数公式

红细胞数/L=N/5×25×10×200×10^6=N/100×10^12/L

3.临床意义

（1）生理性变化：年龄、性别、精神因素、剧烈体力劳动、气压、妊娠中后期

（2）病理性变化

①相对性变化：严重腹泻、呕吐大面积烧伤等

②绝对性变化：真性红细胞增多症、先心病等

4.参考范围

①成年男性：（4.0-5.5）×10^12

②成年女性：（3.5-5.0）×10^12

③新生儿：    （6.0-7.0）×10^12

高于6.8×10^12应采取治疗措施，低于3.5×10^12可诊断为贫血，低于1.5×10^12应考虑输血

三、血红蛋白测定

1.检测方法

（1）HiCN法：ICSH推荐的参考方法，在540nm处有吸收峰，不能与SHb结合；试剂有毒

（2）SDS法（十二烷基硫酸钠法、十二烷基磺酸钠）：在538nm处有吸收峰

2.参考范围

男性：120～160g／L

女性：110～150g／L

新生儿：170～200g／L

3.贫血分级

轻度贫血：＜参考值下线

中度贫血：＜90g/L

重度贫血：＜60g/L

极重度贫血：＜30g/L

四、红细胞形态检查

1.成熟红细胞在瑞氏染色血涂片中呈双凹圆盘形，大小一致，平均直径为7.2μm，淡粉红色，中央1/3为生理性淡染区，无异常结构

2.红细胞大小改变

①小红细胞:红细胞直径＜6μm；缺铁性贫血

②大红细胞：红细胞直径＞10μm；巨幼细胞性贫血

③巨红细胞：红细胞直径＞15μm；巨幼细胞性贫血

3.染色异常

①浅染红细胞。

②浓染红细胞

③嗜多色性红细胞：提示骨髓造血红细胞功能活跃

4. 形态异常

①球形红细胞

②靶形红细胞：珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病

③缗钱状红细胞

④泪滴形红细胞：见于DIC、骨髓纤维化

⑤椭圆形红细胞：巨幼贫、缺铁贫＜15%；大细胞性贫血15%-25%；遗传性椭圆形细胞增多症25%-75%

⑥棘红细胞

⑦口形红细胞

⑧镰形红细胞：HbS

⑨新月形红细胞

5.红细胞内异常结构

①嗜碱性点彩红细胞：胞质中核糖体（大小不一、数量不等的蓝色点状物）等嗜碱性物质（RNA）变形聚集，常见于重金属中毒（铅中毒）

②卡波环（Cabot ring）：红细胞内有呈8字形

③豪焦小体（染色质小体Howell-Jolly body）：紫红色圆柱形小体，可见于巨幼细胞性贫血

④有核红细胞：溶血性贫血等

⑤寄生虫

五、血细胞比容检测

1.检测方法

（1）温氏法、微量法：

①离心速度2264g（有效半径22.5cm，3000r/min）

②离心后由上向下为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层（紫黑红色，读取该层）、带氧红细胞层（鲜红色）

（2）血细胞分析仪法：常用方法

（3）放射核素法：ICSH推荐的参考方法，准确性最高

2.参考范围（温氏法）

成年男性：0.4-0.5

成年女性：0.37-0.48

3.临床意义

①增高：大面积烧伤、呕吐、腹泻等

②减低：贫血

六、红细胞平均指数

1.检测方法（手工法）

①MCV（红细胞平均体积）=HCT/每升血中RBC*10^15（fl）

②MCH（红细胞平均血红蛋白含量）=Hb（g/l）/每升血RBC*10^12（pg）

③MCHC（红细胞平均血红蛋白浓度）=Hb（g/l）/HCT（g/L）

2.贫血的红细胞形态学分类

贫血类型	MCV（fl） 80-100	MCH（pg） 26-34	MCHC（g/l） 320-360	临床意义
正细胞性贫血	正常	正常	正常	急性失血、急性溶血、再障、白血病
大细胞性贫血	增高	增高	正常	巨幼细胞性贫血
单纯小细胞性贫血	降低	降低	正常	慢性感染
小细胞低色素贫血	降低	降低	降低	铁缺乏、地中海贫血、慢性失血

七、红细胞体积分布宽度（RDW）

1.参考范围11%-15%

2. Bessman分类法

MCV	RDW	贫血类型	常见病因和疾病
减少	正常	小细胞均一性	单纯杂合子珠蛋白生成障碍性贫血（轻型）、某些继发性贫血
减少	增高	小细胞不均一性贫血	缺铁性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血（非轻型）、HbH病、铁粒幼细胞贫血、慢性失血性贫血
正常	正常	正常体积均一性	再生障碍性贫血、白血病、慢性病贫血，急性失血
正常	增高	正常体积不均一性	部分早期铁缺乏、血红蛋白病性贫血、骨髓纤维化、铁粒幼细胞贫血
增大	正常	大细胞均一性	骨髓增生异常综合征
增高	增高	大细胞不均一性	巨幼细胞贫血、恶性贫血

八、网织红细胞计数

1.网织红细胞属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA）

2.染色方法：新亚甲蓝、煌焦油蓝

3.Miller窥盘计数

4.参考范围

①绝对计数（24-84）*10^9/L

②相对计数（0.5-1.5）%

5.网织红细胞分型

Ⅰ型（丝球型）

Ⅱ型（网型）

Ⅲ型（破网型）

Ⅳ型（点粒型）：外周血最多见

6.临床意义

①增多：溶血性贫血

②减少：再障（典型再障＜0.5%）、巨幼贫

7.临床应用

①贫血疗效观察：CHr（单个网织红细胞血红蛋白含量）评价缺铁状态

②骨髓移植后检测

③网织红细胞生成指数：

RPI=（Ret%/2）*（患者Hct/正常人Hct）

九、红细胞沉降率测定（红细胞沉降速度）

1.检测方法

①魏氏法；ICSH推荐方法

②潘氏法：末梢采血，适用于儿童

③血沉仪法

2.影响因素

	加快	减慢
血浆蛋白	纤维蛋白原、急性反应蛋白、免疫球蛋白、胆固醇、甘油三酯等	清蛋白、卵磷脂
红细胞数量	数量减少	数量增多、重度贫血
红细胞形态	直径增大	球形红细胞、镰形红细胞
血沉管	倾斜	无
温度	室温高	室温低

3.参考范围

男性：0-15mm/h

女性：0-20mm/h

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